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点ji次数:89 发布时间:2020-06-16

women知dao,Elisa试剂盒可分为多种类xing测定,是yi种广泛应用zai测定液体样本中的蛋白、抗体、huoji素的免yi分xi技术。 wogong司技术bu将各种Elisa常用方法的优势劣势进行dui比,结果如下:

yi、直接法(direct Elisa)

将抗原直接固定zai固相载体shang,加入酶标记的yi级抗体,糲hun刹舛乖芰浚琧iyi级抗体的特异性fei常重要。

1.优势:cao作手续简短,因无须shi用二抗可避免交互反应。

2.劣势:试验中的yi抗都得用酶标记,但bu是每种抗体都适合做标记,费用相duiti高。

二、间接法(indirect Elisa)

ci测定方法yu直接法类si,差别zai于yi级抗体mei有酶标记,改用酶标记的二级抗体去辨shiyi级抗体来测定抗原量。

1.优势:二抗可以加强信号,er且有多种选择能做butong的测定分xi。bu加酶标记的yi级抗体则能保liu它zui多的免yi反应性。

2.劣势:交互反应发生的机率较高。

三、双抗体夹心法(sandwich Elisa)

被检测祄u乖粃ai两个抗体之间,其中yi个抗体将抗原固定于固相载体shang,即捕捉抗体。另yi个则是检测抗体,ci抗体可用酶标记hou直接测定抗原的量;huobu标记,再透过酶标记的二级抗体来测定抗原的量。这两种抗体必须小心选取,cai可避免交互反应huo竞zheng相tong祄u乖岷蟗u位。

1.优势:高灵min、高专yi性,抗原无须事先chun化。

2.劣势:抗原yi定得拥有两个以shang祄u固褰岷蟗u位。

四、竞zheng法(competitive Elisa)

 样本里祄u乖?自由抗原)和chun化并固定zai固相载体shang祄u乖?固定抗原)yiqi竞zheng相tong祄u固澹琩ang样pin里的自由抗原越多,就可以结合越多祄u固澹琫r固定抗原就zhi能结合到较少祄u固澹粗鄏an。经清洗步骤,洗去自由抗原和抗体的复合物,zhiliu下固定抗原和抗体的复合物,拿来yuzhi有固定抗原的dui照zu结果相比较,根ju呈se差异就可计suan出样pin里祄u乖俊Ⅻ/p>

1.优势:可适用比较buchun的样本,er且数ju再xian性很高。

2.劣势:整体的mingan性和专yi性都较差。

五、ELISA技术:基于细胞法(cell-based Elisa)

是yi种新的定性蛋白检测技术,将细胞直接zai微孔板里培养,待检测时,bu需chouti蛋白和裂解细胞,便可直接测量微孔板里蛋白经刺jihuo抑制作用hou的变化。

1.优势:无需裂解细胞,所以mu标蛋白损shizui少,可测定完整细胞、黏fu细胞、还有fei粘fu细胞。

2.劣势:bu能测定抗原量。

以shang这xie您都明白了ma?想要了解更多相关内容zixun。

 
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